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中国P4实验室新论文:哪些动物易把新冠传给人?(图)


来源: ( 澎湃新闻)    2020/4/4 12:53:18   分享内容取自各大媒体,观点仅供参考,不代表本网立场!

新冠病毒被认为起源于蝙蝠,最终有哪些中间宿主帮助病毒跨越物种屏障,感染人类,至今是谜。然而,全球疫情蔓延之际,更多紧迫的疾控问题需尽快给出答案。比如,与人类密切接触宠物、畜禽是否也可能被新冠病毒传染?

  最新的研究显示:新冠病毒在狗、猪、鸡和鸭子身上复制效果不佳,但在雪貂和猫身上却很有效。他们还发现病毒可以通过呼吸道飞沫在猫之间传播。

  以上研究来自中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室、国家动物疫病防控高级别生物安全实验室的研究团队。他们研究旨在弄清楚一些问题:正在广泛传播的新冠病毒会传染给其他动物物种,从而成为感染的“蓄水池”吗?新冠病毒感染在人类中有多种临床表现,从轻微感染到死亡,那么在其他动物中是如何表现的?随着疫苗和抗病毒药物开发的努力,哪些动物可以最精确地用于模拟这些药物或疫苗对人类的效果?

  


  


  

  当地时间3月31日,研究团队在预印本平台bioRxiv上发表了一篇论文,“Susceptibility of ferrets, cats, dogs, and different domestic animals to SARS-coronavirus-2 ”。论文通讯作者为中国科学院院士、中国农科院哈尔滨兽医研究所动物流感基础与防控研究创新团队首席科学家陈化兰,以及中国农业科学院哈尔滨兽医研究所所长、国家动物疫病防控高级别生物安全实验室主任步志高。

  值得一提的是,国家动物疫病防控高级别生物安全实验室是中国现有的两个P4(生物安全等级四级)实验室之一,另一在中科院武汉国家生物安全实验室。这项研究中的所有感染新冠病毒的实验均在P4实验室中进行,获得中国农业农村部的批准。动物研究和动物福利方案由中国农科院动物实验伦理委员会审核通过。

  在这项研究中,作者们研究了与人类密切接触的雪貂和其他动物对新冠病毒的易感性。总体来说,他们发现,新冠病毒在狗、猪、鸡和鸭子身上复制效果不佳,但在雪貂和猫身上却很有效。他们还发现病毒可以通过呼吸道飞沫在猫之间传播。

  研究团队强调,对猫新冠病毒的监测应被视为消除目前COVID-19流行的一种辅助手段。他们认为,这项研究为新冠病毒的动物宿主和疫情的动物管理提供了重要的见解。

  新冠病毒可在雪貂上呼吸道复制长达8天,但不会导致严重疾病或死亡

  雪貂经常被用作人类呼吸道病毒的动物模型。因此,研究团队首先测试了雪貂对新冠病毒的敏感性。

  本研究使用了两个新冠病毒毒株:来自武汉华南海鲜市场F13-E和来自一位新冠病毒感染患者的CTan-H。毒株均由中国疾控中心病毒预防控制所武桂珍教授提供。

  研究团队对雪貂分别经鼻内接种105pfu的F13-E或CTan-H,并在接种后第4天实施安乐死(p.i.)。收集每只雪貂的鼻甲、软腭、扁桃体、气管、肺、心脏、脾脏、肾脏、胰腺、小肠、大脑和肝脏,用qPCR和病毒滴定法进行病毒RNA测定。

 


  

  

  雪貂脏器或组织中病毒RNA:A接种F13-E,B接种CTan-H。

  研究结果表明,所有4只雪貂的鼻甲、软腭、扁桃体中均检测到病毒RNA和传染性病毒,但在其他检测组织中均未看到。

  

  C接种F13-E和DCTan-H的雪貂脏器或组织中的病毒滴度。

  研究团队认为,这些结果表明,新冠病毒可以在雪貂的上呼吸道复制,但没有检测到在其他组织中的复制。

  为了研究病毒在雪貂体内的复制动态,研究团队对6只雪貂经鼻内接种了105pfu的F13-E(3只)或CTan-H(3只),然后将它们安置在隔离且单独分开的三个笼子里。在第2、4、6、8和10天收集雪貂鼻洗液和直肠拭子用于病毒RNA检测和病毒滴定。同时对它们进行了两周的体温和新冠迹象监测。

  


  

  

  接种F13-E(E)和CTan-H(F)的雪貂洗鼻洗液中的病毒RNA。接种F13-E(G)和CTan-H(H)的雪貂鼻洗液中的病毒滴度。

  结果显示,第2、4、6、8天,在所有6只雪貂的洗鼻液中均发现病毒RNA。在一些直肠拭子中也发现了病毒RNA,但拷贝数数明显低于鼻洗液。所有雪貂的鼻洗液中均检测到传染性病毒,但没有一只雪貂的直肠拭子中发现传染性病毒。

  

  


  

  新冠病毒在雪貂消化道的复制。接种F13-E(A)和CTan-H(B)的雪貂直肠拭子中的病毒RNA。接种F13-E(C)和CTan-H(D)的雪貂直肠拭子中的病毒滴度。

  每一组接种病毒的雪貂中分别有一只在第10天和第12天出现发烧和食欲不振。为了调查这些症状是否由病毒在下呼吸道的复制引起,研究团队在第13天对这两只雪貂实施了安乐死,并收集它们的器官进行病毒RNA检测。

  


  

  

  新冠病毒在雪貂体内复制。接种F13-E病毒或CTan-H病毒的雪貂于第13天实施安乐死,收集其器官和组织进行病毒RNA检测。

  然而,除了接种了CTan-H的雪貂鼻甲检测到低拷贝数外,没有在任何其他组织或器官中检测到病毒RNA。

  

  

  

  从一只感染了新冠病毒CTan-H的雪貂身上提取的肺样本的组织学研究。

  病理研究显示,在第13日安乐死的两只雪貂中,有严重的淋巴浆细胞性血管周炎和血管炎,肺泡间隔和肺泡腔中的II型肺泡细胞、巨噬细胞和中性粒细胞的数量增加,肺部有轻度的支气管周炎。

  



  

  

  星号表示在接种病毒后第13天对动物实施安乐死,其余4只在第20天对动物实施安乐死。

  通过ELISA和中和试验,所有雪貂体内均检测到新冠病毒抗体,其中第13天安乐死的两只雪貂的抗体滴度明显低于第20天安乐死的雪貂。

  为了进一步研究新冠病毒是否在雪貂肺部复制,研究团队给8只雪貂经气管内接种了105 pfu的CTan-H,并在第2、4、8和14天分别对2只动物实施安乐死,在组织和器官中检测病毒RNA。

  



  

  

  经气管接种了CTan-H的雪貂脏器中病毒RNA拷贝。

  在第2天实施安乐死的两雪貂和第4天实施安乐死的两只雪貂中,研究人员分别仅在其中一只的鼻甲和软腭中检测到病毒RNA;在第8天实施安乐死的两只雪貂中,其中一只雪貂的软腭检测到病毒RNA,另一只雪貂的鼻甲、软腭、扁桃体和气管中检测到病毒RNA;在第14天实施安乐死的两只雪貂中均未检测到病毒RNA。

  这些结果表明,新冠病毒可以在雪貂的上呼吸道复制长达8天,而不会导致严重的疾病或死亡。

  研究团队在论文的最后还提到,比较而言,新冠病毒和其他在雪貂上呼吸道和下呼吸道均可复制的流感病毒、甚至人SARS-CoV表现出一些不同。新冠病毒只在雪貂的鼻骨、软腭和扁桃体中复制。它也可以在消化道中复制,但即使在气管内接种了病毒,在雪貂的肺叶中仍没有检测到病毒。

  猫高度易感并发生“猫际传播”:应将猫新冠病毒的监测视为疫情防控辅助手段

  值得注意的是,猫和狗与人类有密切接触,因此研究团队认为,除了雪貂这样的实验室动物,了解常伴人类生活的家养动物对新冠病毒的易感性对于COVID-19的控制很重要。

  研究团队首先研究了新冠病毒在猫体内的复制。5只8个月大的亚成年家猫(远交系)经鼻内接种了105pfu的CTan-H,其中2只猫计划在第6天实施安乐死,以评估其器官中的病毒复制情况。3只猫被放在隔离器内的单独笼子里。为了监测呼吸道飞沫的传播,分别有一只未受感染的猫被放在与每只接种病毒的猫相邻的笼子里。

  由于8个月大的猫具有攻击性,因此很难对它们进行常规的鼻腔清洗。为了避免可能的伤害,研究团队收集了这些猫的粪便,并在安乐死后检查它们器官中的病毒RNA。

  


  


  

  第6天实施安乐死的2只亚成年家猫中,鼻骨、软腭和扁桃体中均检测到了病毒RNA,其中一只的气管,以及另一只的小肠中也分别检测到病毒RNA。然而,这两只猫的任何肺样本中都没有检测到病毒RNA。

  在这些猫的病毒RNA阳性的鼻骨、软腭、扁桃体和气管中检测到传染性病毒,但在病毒RNA阳性的小肠中没有发现传染性病毒。



  


  

  猫之间新冠病毒的传播。

  在病毒传播研究中,第三天2只接种病毒猫的粪便中检测到RNA病毒,第5天所有3只接种病毒猫的粪便中均检测到RNA病毒。处于病毒暴露风险的3只猫中,有一只的粪便在第3天检测到病毒RNA。

  粪便呈病毒RNA阳性的接种病毒猫在第11天实施了安乐死,接种病毒猫的软腭和扁桃体,以及病毒暴露猫的鼻骨、软腭、扁桃体和气管中检测到病毒RNA,表明猫之间发生了呼吸道飞沫传播。

  在第12天,研究团队对剩下的猫实施了安乐死。在一只接种了病毒的猫的扁桃体、另一只接种了病毒的猫的鼻骨、软腭、扁桃体和气管中检测到病毒RNA,但在两只病毒暴露猫的任何器官或组织中均未检测到病毒RNA。

  通过ELISA和中和试验,在所有3只接种了病毒的猫和1只暴露于病毒的猫的体内均检测到新冠病毒抗体。

  


  



  


  

  新冠病毒在幼猫中的复制和传播。

  研究团队还在幼猫(70-100天)中重复了上述在亚成年猫中的复制和传播研究。对接种病毒后于第3天死亡或安乐死的幼猫样本进行的组织病理学研究显示,这两只猫的鼻腔和气管粘膜上皮以及肺部均有大量损伤。

  


  


  

  由新冠病毒感染引起的幼猫的组织学损伤。

  这些结果表明,新冠病毒可以在猫体内有效复制,幼猫更容易被感染。更重要的是,病毒可以通过呼吸道飞沫在猫之间传播。

  


  接下来,研究团队同样研究了新冠病毒在狗体内的复制和传播,结果表明,狗对新冠病毒的敏感性较低。类似的研究还表明,猪、鸡和鸭对新冠病毒不易感。

  总的来说,研究团队发现雪貂和猫对新冠病毒高度敏感,狗的敏感性较低,另外包括猪、鸡和鸭子在内的家畜对该病毒不敏感。

  另外,鉴于目前有研究报道新冠病毒利用血管紧张素转换酶2 (ACE2)作为其受体进入细胞,而ACE2主要表达于雪貂气管-支气管粘膜下腺的II型肺细胞和浆液上皮细胞,因此,研究团队认为,阻止新冠病毒在雪貂下呼吸道复制的潜在机制仍有待研究。

  他们同时提到,新冠病毒在雪貂上呼吸道有效复制使它们成为评估针对COVID-19的抗病毒药物或候选疫苗的候选动物模型。

  值得注意的是,这项研究中使用的猫对新冠病毒高度易感,研究团队强调,对猫新冠病毒的监测应被视为消除目前COVID-19流行的一种辅助手段。







(发布时间(NZ): 2020/4/4 12:53:18)

来源: ( 澎湃新闻)

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